Reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR) i testowanie STD

łańcuchowa polimerazy, przedmiotem zainteresowania, łańcuchowej polimerazy, następnie staje, Reakcja łańcuchowa

Czym jest analiza PCR?

Analiza reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) jest techniką laboratoryjną zaprojektowaną do identyfikacji małych ilości DNA w próbce w procesie znanym jako amplifikacja. Podczas amplifikacji PCR, DNA będący przedmiotem zainteresowania jest kopiowane wielokrotnie aż do jego wystarczającej ilości do analizy i wykrywania. Na przykład PCR można wykorzystać do identyfikacji niewielkich ilości DNA z organizmów, które powodują rzeżączkę lub chlamydię, które są obecne w próbce moczu.

Jak działa PCR?

Pierwszym krokiem w PCR jest podgrzanie próbki tak, aby dwuniciowy DNA oddzielił się na dwie pojedyncze nici – to się nazywa denaturacja. Następnie startery, krótkie próbki DNA, które pasują do końców sekwencji DNA będącej przedmiotem zainteresowania, są łączone z próbką DNA. Następnie stosuje się polimerazę DNA do rozpoczęcia replikacji DNA w miejscu startera. Na koniec DNA jest podgrzewane w celu oddzielenia nici jeszcze raz, a cały proces PCR rozpoczyna się ponownie. Ilość segmentu DNA będącego przedmiotem zainteresowania w próbce wzrasta wykładniczo w każdym cyklu PCR: jedna kopia staje się dwie, następnie staje się cztery, następnie staje się ósmą itd .; więc ogólnie, potrzeba jedynie 20 do 40 cykli, aby określić, czy DNA jest obecne (i, jeśli jest, dostarczyć wystarczającą próbkę do analizy).

Wszystkie etapy reakcji łańcuchowej polimerazy – denaturacja DNA, stosowanie starterów i wydłużanie DNA – zachodzą w różnych temperaturach, więc po połączeniu początkowej mieszaniny, etapy można kontrolować za pomocą procesu znanego jako

termocykling , w którym temperatura utrzymywana jest na niezbędnym poziomie przez wystarczająco długi czas, aby można było wykonać każdy krok.Zatem PCR jest skutecznym sposobem wzmacniania ilości docelowego DNA w pojedynczej probówce z niewielką potrzebą interwencji człowieka.

Reakcja łańcuchowa polimerazy stanowiła rewolucję w technice biologicznej, gdy została opracowana po raz pierwszy we wczesnych latach 80. XX wieku, a twórca PCR, Kary Mullis, zdobył Nagrodę Nobla w dziedzinie chemii za swoją pracę w 1993 r.

Dlaczego PCR jest istotna przy testowaniu STD?

Okazało się, że reakcja łańcuchowa polimerazy i związane z nią techniki, takie jak

łańcuchowa reakcja , mają coraz większe znaczenie dla testów STD. Jest tak dlatego, że techniki te mogą bezpośrednio identyfikować małe ilości wirusowego DNA lub RNA w próbkach. Identyfikacja kodu genetycznego patogenu nie wymaga obecności patogenu – podobnie jak kultury bakterii lub kultury wirusowej. Nie wymaga to również, aby infekcja wystąpiła wystarczająco dawno temu, aby ludzie wykrywali wykrywalną reakcję przeciwciał (taką jak wykryto w teście ELISA). Oznacza to, że techniki PCR mogą czasami wykrywać choroby wcześniej niż inne testy, i bez tak samo jak konieczność troszczenia się o utrzymanie próbek żywych lub testowanie w dokładnie właściwym czasie.

Like this post? Please share to your friends: